2名卵巢早衰POF患者接受干细胞卵巢注射，7个月后恢复卵巢功能

卵巢早衰（POF）是指女性在40岁之前就出现卵巢功能衰竭，以血清促性腺激素高、雌激素低和缺乏成熟卵泡为特征，病情则以闭经或者不孕为主。

POF常见的危险因素主要有：自身免疫性卵巢损伤、染色体和基因缺陷、感染因素、医源性因素等。

该病的诊断标准是指：40岁以前出现至少4个月以上闭经, 并有2次或以上卵泡期血液检查，显示血清卵泡刺激素（FSH）>40U/L (两次检查间隔1个月以上) , 雌二醇（E2）水平<73.2pmol/L。

POF在40岁之前的发病率为1／100，30 岁之前为1／1000，20岁之前为1／10000，且发病率呈逐年上升的趋势。POF在临床上并不少见，其中在原发闭经者中占10％～28％，继发闭经者中占4％～18％。POF患者雌激素水平低下，可出现情绪不稳定、抑郁、烦躁、月经失调、性欲减退、不孕等相关症状。

且近年来呈上升和年轻化趋势。卵巢早衰对女性生殖健康的两大威胁主要是雌激素水平降低及生育能力丧失，雌激素水平降低增加了女性患骨质疏松和冠心病的危险。

目前西医主要采取激素补充治疗，经典治疗方案为性激素补充治疗，即雌、孕激素序贯和雌孕激素联合两种方案。但长期应用有增加子宫内膜癌、乳腺癌的风险，因此探寻一种高效、安全的治疗手段是当务之急。

有学者研究发现，干细胞疗法可以有效修复受损的卵巢组织结构和功能。

2020年伊利诺伊大学芝加哥分校妇产科进行了两例高加索妇女的卵巢早衰病例研究。他们采用BM-MSCs治疗2例POF患者，7个月后成功恢复了卵巢雌激素分泌和月经。这项试验临床研究已在ClinicalTrials.gov注册（编号：NCT02696889），研究结果发表在《Journal of Medical Case Reports》

案 例1：一名36 岁的白人女性因继发性闭经4年就诊，因服避孕药3年以推迟生育，在2012年1月停止服药后尝试怀孕，发现已经闭经。2012年5月，入院诊断出她患有 POF，FSH (110 IU/ L)和黄体生成素(LH) (53.89 IU/L)，以及低E2 (< 10 pg/ml)，同时出现更年期症状（潮热和阴道干燥）。后来接受了激素替代疗法(HRT)缓解症状，但病情没有得到很好的改善。此外，在极少数情况下，发现她月经周期中有一两个卵泡，但并没有排卵。

方 法：

腹腔镜和右卵巢直接注射：获得患者知情同意后，采集约150ml骨髓组织进行分离培养，获得所需的BM-MSCs，然后使用5毫米注射器（22号针）通过腹腔镜将BM-MSCs（4毫升，含有5× 108个细胞）直接注射到右侧卵巢中（图1），将类似量（4ml）的生理盐水注射到左侧卵巢中作为对照。

图1、间充质干细胞注射后卵巢形态学变化

a注射前萎缩的卵巢（绿色箭头）（低放大倍数）。b注射前萎缩的卵巢（绿色箭头）（放大）。c腹腔镜抓握器（绿色箭头）通过干细胞注射器（红色箭头）在注射过程中稳定卵巢。d萎缩的卵巢（绿色箭头）在注射过程前稳定到位。e注射干细胞。f子房（绿色箭头）注射过程接近尾声（注意肿胀和卵巢大小明显增加

经阴道超声成像：MSC植入后，使用标准的经阴道超声技术在1周、1个月、3个月、6个月、9个月和12个月时测量子宫内膜厚度、卵巢体积和窦卵泡计数 (AFC)。

血清激素水平生化评价及症状评价：在移植后1周和1、3、6、9 和12个月检查血清激素谱。检查的激素包括FSH、LH、抗苗勒管激素 (AMH)、E2和黄体酮。使用标准实验室技术通过放射免疫测定法对血清激素进行定量。由患者都向研究协调员自我报告了症状。

结 果：受试者卵巢体积从移植前的0.63 cm3增加到随访第1周的2.5 cm3；3周后增加到2.05 cm3；3个月和6 个月时随访显示卵巢体积稳定，分别为2.3cm3和2.7cm3；7个月后月经恢复，卵巢体积增加（图2）。这些数据表明，右侧卵巢对BM-MSCs原位注射有特异性反应。

图2、卵巢植入间充质干细胞后测量的卵巢体积（ cm3）

此外，我们还注意到BM-MSCs移植后血清雌激素水平总体增加（图3）。移植前雌激素水平<10.9 pg/ml，移植后1周增加至20 pg/ml（图3）；移植后6个月，雌激素水平达到26.1 pg/ml。血清FSH和LH水平也发生变化，如图4和图5所示。

图3、间质干细胞卵巢植入前后的血清雌激素水平的量化。箭头表示间质干细胞移植后7个月内恢复的月经。

图4、血清卵泡刺激素(FSH)水平在骨干细胞卵巢植入前和植入后的报告

图5、间质干细胞卵巢植入前后检查血清黄体生成素（LH）水平

案 例2：是一位42岁白人女性，因继发性闭经就诊，她的FSH较高（155 IU/L），月经一直正常规律，后因左侧卵巢囊肿接受左侧卵巢切除术和子宫肌瘤切除术，术后发生继发性闭经，发展为卵巢早衰。

方 法：采用案例1同样的方式治疗，该患者因为左侧卵巢切除，所以没有对照。BM-MSCs移植后，使用标准经阴道超声技术在1周、1个月、3个月、6个月、9个月和12个月时进行各项数据评估。

结 果：在9个月的随访中观察到雌激素水平升高。FSH、LH或孕酮水平没有变化。两名患者都报告了更年期症状的减少，例如潮热、盗汗和性交疼痛。两名患者均在BMSC植入后7个月报告了1次月经事件（阴道出血3天，量为轻度至中度）。

总结：以上研究结果十分令人鼓舞，2名POF患者在接受自体骨髓间充质干细胞疗法植入卵巢后，卵巢体积明显增大，雌激素水平整体升高，患者月经恢复，更年期症状明显改善。研究中没有发现并发症和不良反应。

卵巢早衰是女性生殖系统健康的最大威胁之一。通过卵巢内注射间充质干细胞成为治疗卵巢早衰的新途径。相信在不久的将来干细胞一定会带给人类更多的惊喜。

参考文献：Prosper Igboeli1, Abdeljabar El Andaloussi2, Ujalla Sheikh1, Hajra Takala1, Amro ElSharoud1, Ashley McHugh1,Larisa Gavrilova-Jordan3, Steven Levy4 and Ayman Al-Hendy1*.Intraovarian injection of autologous human mesenchymal stem cells increases estrogen production and reduces menopausal symptoms in women with premature ovarian failure: two case reports and a review of the literature. doi: 10.1186/s13256-020-02426-5.